由于朊病毒的特殊性,周文做实验时格外小心。
生物口罩、生物手套、生化防护服,武装齐全。
而秦海涛他们四个人,只是帮忙打下手,没有直接接触装有病毒的器皿。
检测朊病毒,目前一共有四种方法。
1,电镜法。
2,毛细管SDS-凝胶电泳法。
3,荧光标记肽链的毛细管电泳免疫测定法。
4,双色强荧光目标扫描法。
其中第二种“凝胶电泳法”是最好、最直接的检测方法。
主要是通过理化方法——差速、超速离心,sodiumN-lauroylsarcosine(月桂酰肌氨酸)、PK处理,提纯PrPsc。
然后在“毛细管电泳仪”上进行毛细管SDS-凝胶电泳。
根据各组分通过检测器时,在214nm波长处产生吸收峰的时间和峰形,鉴别出朊病毒病原因子PrPsc。
这个方法标本用量少,而且不需要免疫学试剂,判断很直观。
缺点是需要用到“超速离心机”以及“专用毛细管电泳仪”这两样设备。
超速离心机,目前基本上都是采购的国外品牌,售价高达50万RMB起。
而朊病毒专用毛细管电泳仪也非常昂贵,需要二十多万RMB。
价格昂贵就算了,关键用到的机会少啊。
一般医院连采购设备的钱都赚不回来,也只有像江州医院这样有钱的三甲医院才会采购。
正因为如此,大城市的医疗资源才稀缺。
小城市得了个怪病,你连检测都做不了。
周文按照理化方法,一步步小心翼翼的制备试剂、提取稀释液、放到超速离心机上分离变异朊病毒蛋白。
刚刚升级的生物免疫学,让他更加的得心应手。
在这个过程中,周文也在教导秦海涛以及董文颖几个人,告诉他们常规朊病毒理化试验过程中需要注意的地方。
“添加月桂酰的时候,你们一定要记住……”
这些经验,别说大学教授了,就算是国内那些朊病毒研究所的专家也讲不清楚。
因为国内在病毒、尤其是朊病毒研究方面,基本上还处于初级阶段,这些实用经验,只有国外那些顶尖研究所才能掌握。
比如英国肯特大学酵母朊病毒研究所。
长久以来,朊病毒蛋白领域的新发现,几乎都被几个酵母领域的研究团队“垄断”。
那些顶尖研究所,是不会轻易把技术教授给你的。
除非你能拿到他们的offer。
而秦海涛他们显然还没有意识到自己是有多么的幸运,只是觉得周文的讲解非常的浅显易懂,甚至连动作要领都一并告诉了他们。
在周文说的时候,秦海涛和董文颖两个人都是聚精会神的听着。
至于另外两个老实验员,虽然表面上在听,实际上根本没有听进去。
因为他们觉得,以周文的方法根本不可能提取到朊病毒,这样的教学根本就是在纸上谈兵。
周文又没有“电眼”,他怎么可能知道这些具体的实验变量呢,一切不过都是他的猜测而已。
等提纯好PrPsc后,周文把含有朊病毒的清液注入到贝克曼P/ACE5500上,进行电泳实验。
“好了~”注入完毕后,周文松了口气。
“秦海涛你留下来照看机器,其他人洗手吃饭吧。”
大家闻言,纷纷去洗手池洗手……
吃过饭后,周文哪也没敢去,直接回了实验室。
常规提取法获得的样本太稀少了,不亲自看着实在不放心……
晚上七点半,电泳实验结束。
其中一名实验员黄兴中,拿着电泳分析单随意的看了眼,潜意识认为,这次的实验还会跟之前一样失败。
然而下一秒,他脸上就露出了惊讶的神色,“咦,你们快来看,好像检测到朊病毒了……”
其余几个人闻言,纷纷围了过来。
“咦,还真是嗳。”
“老师你快来看,我们检测到朊病毒了。”
“嘶嘶……不应该啊,这怎么可能呢,是不是搞错了……”
周文接过分析单仔细看了看,很快脸上露出了抑制不住的喜色。
不管之前的实验做的有多么顺利,在结果出来之前,没有什么事情是百分之百的。
比如,毛细管电泳仪出现故障,同样也会导致检测失败。
这将使得之前所有的努力全部白费。
所以有时候做实验,运气也占了一部分因素。
等确定不是眼花后,大家脸上都露出了难以言喻的激动神色。
说实话,包括秦海涛以及董文颖在内,都不认为常规方法下能提取到朊病毒蛋白。
在不抱有希望的前提下,靠着常规采集方法提取到朊病毒蛋白,真得是一件特别自豪的事情。
等兴奋过后,秦海涛立刻通知杨立群以及张曙光。
两个人闻言后,立刻赶了过来。
“根据检测显示,这是聚集体朊病毒……”
杨立群和张曙光,看着明明白白的电泳分析单,脸上充满了惊讶、喜悦、兴奋、激动以及难以置信的神色。
“这真是尿液里面检测到的?”
“是得张组!样本是我和周文一起采集的。”
听到董文颖的话,杨立群和张曙光一脸的不可思议。
常规检测和非常规检测的情况下,提取到朊病毒,意义完全不同。
这是一个非常重要的发现,具有很高的研究价值。
“你们都是好样的。虽然这只是朊病毒研究的一小步,但却是咱们中国在朊病毒领域的一大步。”
“谢谢杨组夸奖。主要还是周老师的原因,要不是他一直在坚持的话,我们可能一看就放弃了。”
杨立群和张曙光看向周文。
他们两人一直都非常看好这个年轻人,而周文也不负所望,其在生物医学方面,展现出了非常强大的天赋。
而且还经常带给他们一些惊喜。
比如这次。
昨天他们还预言说,绝对不可能在常规采集方法下,提取到朊病毒蛋白。
结果周文隔天就“打脸”。
不过这个脸打的舒服。
如果可以的话,他们希望他继续打脸,最好左右开弓!
激动之后,杨立群和张曙光两人到电脑上分析研究样本采集记录,希望从中找出一定的规律来。
周文对杨立群和张曙光的行为,也是非常的敬佩。
这才是科学研究该有的精神呢。
虽然谁都不希望在常规状态下采集到朊病毒蛋白,但是不能因为不希望而不去研究。
只有知道哪些因素会导致朊病毒蛋白通过体液排泄,才可以更好的进行预防控制。
第二天早上,杨立群把周文的发现,上报到了医院,请求正式成立检测中心下属的“朊病毒研究小组”。
医院领导,为此召开了专门会议,研究讨论要不要批准成立这个研究小组?
作为背靠江州大学的附属第一人民医院,无论是硬件设备还是人才储备,其实都不算太差,但为什么就是比不过其他医院呢?
究其原因,主要是江州一院样样通、样样松,没有一样拿得出手的“绝活”。
比如省内的金陵军总医院,在肾病方面,全国都是赫赫有名的。
比如中海的华山医院,在皮肤科、感染科、神经科则非常牛逼。
再比如京都大学第一医院,在泌尿外科强无敌。
还有长征医院的骨科……
至于四大天团,北协和、南湘雅、东齐鲁、西华西,那是神仙级别,江州医院拍马都赶不上。
总之,江州医院在省内还能跟除了金陵以外的其他市立医院比比,放到国内来说,根本不值一提。
正因为如此,江州医院急需要一样拿得出手的医技“镇场子”。
最后,研究小组申请获得了全票通过。
由于江州市……应该说整个苏东省,根本没有朊病毒方面的权威专家。
而作为该病毒研究的发起人杨立群、张曙光以及周文,无疑成为了研究小组的骨干人选。
在杨立群和张曙光的推选下,周文成为了检测中心【朊病毒研究小组】组长,他们两个是名誉副组长。
第一批小组成员:秦海涛、董文颖、黄兴中、刘杉…….
——
ps:对不起,求……
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